Untersuchungen zum Abbau des extrazellulären Polysaccharids von Botrytis cinerea

Stahmann, K.-P.

Book/Report

FZJ-2018-03895

Untersuchungen zum Abbau des extrazellulären Polysaccharids von Botrytis cinerea

Stahmann, K.-P. (Corresponding author)FZJ*

1992
Forschungszentrum Jülich GmbH Zentralbibliothek, Verlag Jülich

Jülich : Forschungszentrum Jülich GmbH Zentralbibliothek, Verlag, Berichte des Forschungszentrums Jülich 2659, 88 p., Anh. (1992)

Please use a persistent id in citations: http://hdl.handle.net/2128/19215

Report No.: Juel-2659

Abstract: Ziel der vorliegenden Arbeit war es, zu klären, ob Botrytis cinerea das selbst gebildete, extrazellulär lokalisierte $\beta$- (1,3)(1,6)-D-Glucan (Cinerean) wieder abbauen kann. Durch Tuschekontrastfärbung und Gravimetrie wurde gefunden, daß das Polysaccharid eine Hyphenkapsel bildet . In Fermenterkulturen wuchs diese zu einer Matrix, in die die Hyphen eingebettet waren, zusammen. Durch den Rührer, oder im Schüttelkolben durch die Schikanen, löste sich ein Teil unter Bildung eines hochviskosen Schleims ab. Selbst nach Zentrifugation mit 25860 g$_{max}$ blieben 60 % des Glucans am Myzel haften. In Wachstumsexperimenten auf Mineralsalzmedium mit Glucose wurde gefunden, daß der Pilz während des Wachstums Cinerean bildet und es nach Verbrauch der Glucose wieder abbaut. Im Kulturüberstand wurde nach Verbrauch von 20 g/l Glucose 1,9 g/l Cinerean gefunden, das nach 10 Tagen bis auf 4 % abgebaut war. Gleichzeitig wurde die Cinereankapsel abgebaut, so daß das Myzeltrockengewicht von 9,5 g/l auf 4,5 g/l abnahm. Die Abbauphase wurde von einer Skierotienbildung und einer intensiven Mikrosporulation (bis 10 6 /ml) begleitet. Während des Wachstums auf Glucose lag die Cinereanaseaktivität im Kulturüberstand unter der Nachweisgrenze (<0,4 U/l).Nach Verbrauch der Glucose stieg sie bis auf 30 U/l an. Die hemmende Wirkung der Glucose auf die Cinereanasebildung wurde durch Zugabe von zusätzlicher Glucose oder Cycloheximid bestätigt. Zudem wurde nachgewiesen, daß die Anwesenheit von $\beta$-1,3-Glucanen im Kulturmedium für die Cinereanasebildung nötig ist. Während des Wachstums auf Glycerin, Pektin oder Stärke war keine Aktivität (< 0,01 U/g Trockengewicht) zu finden. Dagegen bildete der Pilz während des Wachstums auf Cinerean oder Laminarin 5,7 U/g Trockengewicht. Die Spaltprodukte des Cinereans wurden dünnschichtchromatographisch und mit einem Borat-Komplex-Anionenaustauscher analysiert, Der enzymatische Abbau erfolgte in zwei Schritten. Zuerst wurde die $\beta$-1,3-Bindung unter Bildung von Glucose und Gentiobiose hydrolysiert. Dann erfolgte die Spaltung der Gentiobiose. Die [...]

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